近期在对ELISA试剂盒检测原理，试剂盒检测方法进行分析研究，因为我听说微谱是目前我国试剂盒检测、研究开发、技术研究全面的机构，是一家非常值得信赖的大型检测机构，于是我就去微谱寻找试剂盒检测原理，试剂盒检测方法。经过我长时间的材料收集我收集了很多关于试剂盒检测的有关材料，下面就是我收集的材料，大家可以看看，我相信看完之后大家对试剂盒检测有一个初步的认识。

褪黑素（MT）ELISA试剂盒（#abx354613）检测原理

该试剂盒基于竞争性酶联免疫吸附测定技术。抗体被预先包被在96孔板上。将标准品、测试样品和生物素结合试剂添加到孔中并孵育。生物素标记的MT与未标记的MT之间发生竞争抑制反应。然后加入HRP结合试剂，并孵育整个培养皿。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的结合物。TMB底物用于定量HRP酶促反应。加入TMB基质后，只有含有足够MT的孔才会产生蓝色产物，然后在加入酸性停止溶液后变为黄色。黄色的强度与镀液中MT的结合量成反比。用分光光度法在450nm的微孔板读卡器中测量OD，由此可计算MT的浓度。

ELISA试剂盒有几种检测方法

1、用OVA（卵清蛋白）做一些哮喘，过敏性肠炎的模型，后来会检测粘膜特异性的sIgA以及血清里面IgG，IgE等指标。

2、对于一些小分子的检测，比如前列腺素、糖皮质激素的检测，我的理解是要用竞争法ELISA去检测，也要采用这个方法的盒子。一般细胞因子的检测，都是采用常规的夹心法ELISA检测，因为因子分子量比较大，一般10几个KD左右，很容易找到两个或者多个抗原表位。而小分子很难找到两个不同的表位，也就决定了包被抗体和检测抗体无法同时结合小分子并固相化。解决方案就是酶标板上包被二抗，每个孔加入一定量的酶标的小分子，然后加样品，再加不带标记的检测抗体，显色底物。样品的目的小分子的含量越高，吸光度越低。

3、对于胰岛素的检测。

4、做实验面向的ELISA试剂盒种属主要是人，大鼠和小鼠，现在市面上鸡、牛、马、羊、兔各种指标的盒子都有售，真不知道这些抗体是怎么来的。这些炎症指标还是有很大种属特异性的。

5、好多人有个误区，拿来一个指标就想当然地尝试用ELISA去检测，其实应该多动脑，该检测活性的检测活性，该做western的做western。ELISA试剂盒检测方法简单，灵敏度高。

Elisa试剂盒评价标准

①准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，应大于等于0.9900。

②灵敏度：反应试剂盒的低检测浓度

③特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

④重复性：板内、板间变异系数

⑤回收率：判断实验的准确性和特异性

试剂盒的检测在医学方面具有重大意义，它有利于有关医疗试剂的研发和生产。试剂盒检测直接关关乎这疫苗的研发和生产，它关乎的千千万万人的生命安全，试剂盒的检测有效的推动我国医疗水平的发展，有利于我国疾病疫苗的研发和生产，保证了我国的医疗安全。