分离胶根据配比可以制作出不同的浓度，而分离胶的选择主要取决于我们需要进行筛选蛋白的分子量大小，不同的分离胶浓度对不同的蛋白分子量的分辨率不一样，这种筛选其实是利用了蛋白质样品在分离胶中的分离主要取决于它的电荷性质，分子大小和形状，分离胶的孔径有一定大小把不同大小的蛋白质相互分开。小编在微谱整理了有关10%分离胶的配方的相关资料，快来看看吧！

10%分离胶的配方公式

分离胶与浓缩胶的浓度计算公式：A%*Va/V总 =C，A%为30％凝胶贮备液， 例如，12%的分离胶：0.3*10/25=12%

10%分离胶的配方所需材料

蒸馏水、30%Acr-Bis(29:1)、1M Tris，pH8.8、10% SDS、10%过硫酸铵、TEMED等等

10%分离胶的配方以及在制作时的注意事项

配10%的胶10ml,当然用3.33ml 30%的arc-bis储液,1.5M的分离胶缓冲液是4倍的,所以用2.5ml,10%SDS100ul,10%AP100ul,补水***10ml即可。

APS和TEMED是促凝的，根据温度加入的量是可以变动，一般不超过30％。

玻璃板一定要洗干净，否则制胶是会有气泡。

聚丙烯酰胺具有神经毒性，操作时注意安全，戴手套。（凝胶以后，聚丙烯酰胺毒性降低。）

凝胶的时间要严格控制好，一般在20-30min。

点样时，如果孔比较多，尽量点在中央。（点在边上时，跑出的带是斜的）

点样前要排尽胶底部的气泡，防止干扰电泳。

电泳结束后，取胶时，小心把玻璃板翘起（防止再次落下）。

脱色时，尽量多次进行换水。

上样量不宜太高，蛋白含量每个孔控制在10μg-50μg,，一般＜15μl。

做胶时，凝胶时间控制在25min。梳子需一次平稳插入,梳口处不得有气泡,梳底需水平。

上样时，Marker***好标在中间，边上的孔尽量不要上样。

制胶时，在加APS前尽量不要搅拌，加入APS后可以轻轻搅拌，不要产生气泡。

分离胶缓冲液的pH一定要准确，尽量在20℃左右调掉8.8

安装电泳槽时要注意均匀用力旋紧固定螺丝，防止夹坏玻璃板，避免缓冲液渗漏。

凝胶配制过程要迅速, 催化剂TEMED要在注胶前再加入,否则凝结无法注胶。注胶过程***好一次性完成,避免产生气泡。

微量注射器（加样器）上样时, 注射器不可过低,以防刺破胶体；也不可过高, 样品下沉时易发生扩散，溢出加样孔。

剥胶时要小心,保持胶完好无损,染色要充分。

注意：温度，时间，光照，APS和TEMED都会对凝胶产生影响

10%分离胶的配方出来的线性分离范围

6%——50-150kDa

8%——30-90 kDa

10%——20-80 kDa

12%——12-60 kDa

15%——10-40 kDa

上文内容就是关于10%分离胶的配方的介绍，需要注意的是分离胶室内保存一般不低于半年，并且保存时间的长短还与保存的温度有一定关系。你还有其他疑问吗？我们微谱还整理了其他很多相关的资料，想要了解更多就赶紧来收藏我们吧。